伯樂電穿孔儀 165-2661 是一款基于高壓脈沖瞬態電場原理設計的高精度生物電穿孔系統。
其主要功能是利用可控電場暫時改變細胞膜通透性,使外源性核酸、蛋白質、藥物分子或納米顆粒進入細胞內部,從而實現基因導入、細胞轉化或分子傳遞。
該系統的原理涵蓋 電氣工程學、高壓脈沖物理學、生物膜電介質特性 以及 自動化控制技術。
通過高能儲存電容、智能電壓調節、時間常數控制和實時反饋機制,165-2661 可在毫秒級內生成穩定、可重復的電場脈沖,實現能量高效釋放與精準控制。
細胞膜由磷脂雙分子層構成,屬于一種高電阻、低介電常數的電介質。
其厚度約為 5–10 nm,正常情況下可阻止大分子離子自由通過。
當外部施加電場 EEE 時,膜兩側電位差 VmV_mVm 按下式增長:
Vm=1.5Ercos?θV_m = 1.5 E r \cos\thetaVm=1.5Ercosθ
其中 rrr 為細胞半徑,θ\thetaθ 為電場方向角。
當 Vm≥1.0–1.5VV_m \ge 1.0–1.5 VVm≥1.0–1.5V 時,膜的介電強度被擊穿,局部形成瞬時孔道(transient pores)。
孔道在電場撤除后可恢復閉合,稱為 可逆性電穿孔。
電穿孔可分為三個階段:
極化階段:外加電場使膜電位升高;
孔形成階段:局部磷脂結構重排形成通道;
恢復階段:電場移除后孔道自發修復。
這些過程均發生在毫秒至微秒級時間尺度內,因此需要設備能夠在極短時間內產生高強度、可控的電場脈沖。
165-2661 的核心系統包括五大子模塊:
高壓能量存儲與放電系統;
電壓與波形控制系統;
時間常數與電阻匹配模塊;
反饋檢測與安全防護系統;
中央控制與人機交互系統。
各模塊之間通過高速信號總線相互協調,實現能量控制、狀態檢測、數據采集與結果記錄的閉環運行。
系統使用高耐壓聚丙烯電容器陣列進行能量儲存,容量范圍 25–3275 μF。
在充電階段,電源模塊將 AC 電壓轉換為 DC 高壓,逐步為電容充電。
儲能過程遵循:
W=12CV2W = \frac{1}{2} C V^2W=21CV2
其中:
WWW:能量(焦耳);
CCC:電容;
VVV:電壓。
電容儲能能力決定單次脈沖的總能量輸出。
當觸發放電命令后,控制電路導通可控硅(SCR)或功率晶體管(IGBT),將儲能電容的能量瞬時釋放至負載電路(即電擊杯電極)。
樣品液體位于電極之間,形成均勻電場區域,能量在數毫秒內完成傳遞。
165-2661 允許用戶設定電壓值,并自動根據電容與樣品電導率計算放電能量。
在自動模式下,系統實時調節輸出電壓,以保證恒定能量密度,確保電穿孔條件穩定。
165-2661 支持兩種放電波形:
指數衰減波(Exponential Decay Pulse):電壓隨時間按指數規律下降,特征為單峰瞬態;
方波(Square Wave Pulse):電壓保持恒定持續一段時間后迅速切斷,電場強度均勻。
指數波通過電容放電回路實現,其電壓變化遵循:
V(t)=V0e?t/τV(t) = V_0 e^{-t / \tau}V(t)=V0e?t/τ
方波則由開關電源與脈寬調制(PWM)技術控制輸出電壓保持恒定,并在設定時間后快速關斷。
用戶可根據細胞類型選擇波形:
微生物與真核單細胞常用指數波;
動物細胞與原生質體常用方波以減少熱損傷。
時間常數 τ=R×C\tau = R \times Cτ=R×C,表示電壓衰減速度或脈沖持續時間。
在電穿孔過程中,τ 值反映電場作用時間。
τ 太短:孔未完全形成,轉化率低;
τ 太長:細胞膜無法及時修復,損傷嚴重。
適宜范圍通常為 4–8 ms。
不同樣品體系導電率差異較大。
165-2661 內置自動匹配模塊(Auto-R),可實時檢測樣品電阻并調整放電回路的負載,以保持 τ 值穩定。
在多脈沖模式下,系統會在每次放電間隔期間重新評估樣品電導率,根據變化自動微調輸出參數,從而保證連續實驗條件一致。
系統內置多路監測通道:
電壓檢測:采樣放電波形,反饋實際電壓值;
電流檢測:通過分流電阻測量電流;
溫度檢測:監測電容組與 ShockPod 溫度;
蓋鎖檢測:確保安全鎖閉合。
采樣頻率高達 100 kHz,可實時計算電壓曲線與能量釋放率。
蓋鎖聯動保護:未閉合蓋鎖時放電回路被斷開;
自動放電電路:實驗結束后自動釋放殘余高壓,避免觸電;
過壓保護:當輸出電壓超出設定上限 5% 時自動中止;
溫度保護:檢測溫度超過 45 ℃ 自動暫停;
接地監控:若接地電阻高于 1 Ω,系統禁止啟動。
這些機制確保設備在高壓環境下安全穩定運行。
165-2661 采用高性能 32 位微控制器作為中央處理單元。
其功能包括:
解析用戶設定參數;
控制電容充放電時序;
實時采集電壓、電流信號;
計算 τ、能量釋放、效率等指標;
存儲與導出實驗數據。
每次放電數據均自動記錄:
設定與實測電壓;
電容值與時間常數;
實際放電波形曲線;
能量釋放率(%);
實驗編號與日期。
可通過 USB 接口導出為 .csv 文件,用于后續統計與分析。
配備高亮液晶屏與旋鈕式操作界面。
顯示參數包括:
電壓、電容、波形類型、時間常數;
能量釋放、溫度、系統狀態;
數據存儲及導出選項。
菜單化界面簡化了復雜操作,使研究人員能快速配置實驗方案。
ShockPod 是樣品能量傳遞的核心部件。
內部設有高導電性金屬電極,通過觸點與主機連接形成閉合放電回路。
電擊杯插入 ShockPod 后,蓋鎖自動壓緊觸點,確保電場均勻分布。
電極采用平行板結構,使樣品液體內電場強度分布均勻。
電場強度計算公式:
E=VdE = \frac{V}blqql0fE=dV
其中 ddd 為電極間距(0.1–0.4 cm)。
均勻電場有助于所有細胞同時受到相同電位差,提高轉化均勻性。
ShockPod 材質為高介電強度聚碳酸酯,耐壓達 10 kV,具良好絕緣性。
內部具備泄放通道,放電后殘余能量可被安全引導至接地系統。
能量傳遞流程如下:
高壓電源 → 儲能電容 → 放電開關 → ShockPod 電極 → 樣品液體 → 電極回路 → 電流監測模塊。
該路徑中,任何接觸電阻或雜質都可能影響電場均勻性,因此系統設計強調接觸面的穩定性與導電一致性。
單位體積能量密度 U=12εE2U = \frac{1}{2} \varepsilon E^2U=21εE2,決定了細胞膜受電場影響的強度。
當能量密度處于 0.1–0.5 J/cm3 范圍內時,細胞膜可實現高效、可逆穿孔。
超過 1 J/cm3 則易造成不可逆損傷。
165-2661 通過動態能量控制,確保能量密度始終維持在安全高效區間。
系統內置參考電壓源,每次開機時自動對輸出電壓進行比對校正。
偏差超過 ±1% 時觸發自校準程序。
使用內部標準電阻和電容自動測試放電曲線,計算 τ 值并校正軟件參數。
當檢測到電容老化或溫度變化時,控制系統會自動提高充電電壓或調整電阻匹配,實現穩定輸出。
165-2661 的系統運行遵循以下邏輯步驟:
初始化階段
系統自檢電源、電容、蓋鎖、溫度、通信接口;
通過后顯示“READY”。
參數設定階段
用戶輸入電壓、電容、波形、次數等參數;
MCU 計算相應能量與時間常數。
充電階段
電容組逐步充電至目標電壓,電壓采樣系統實時監控;
達到設定值后自動停止。
檢測階段
再次檢測蓋鎖與電極接觸狀態。
放電階段
觸發開關導通,電容能量釋放形成脈沖;
同時采樣電壓、電流波形。
反饋與記錄階段
系統計算實際 τ 值、能量釋放率,存儲實驗數據。
自動放電階段
殘余電壓通過放電電阻組釋放,確保安全。
整個過程由中央處理器全自動控制,無需人工干預。
主機內部采用金屬屏蔽層隔離高壓模塊與控制電路,防止電磁干擾影響信號采集。
電源入口配有多級濾波器與穩壓裝置,確保輸入電壓平穩。
內置熱敏電阻檢測電容溫度,超過閾值自動啟動風扇冷卻。
采用獨立接地系統,確保高壓放電時電位差迅速釋放至地面。
高能量控制精度 —— 電壓誤差 ±1%,時間常數誤差 ±0.05 ms;
波形靈活性強 —— 支持指數波與方波切換;
智能反饋系統 —— 實時記錄與動態校正;
安全保護完善 —— 蓋鎖、過壓、溫度、接地多重防護;
可追溯數據管理 —— 自動記錄放電曲線與能量參數;
高適用性 —— 兼容細菌、酵母、動物細胞與植物原生質體。
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